小鼠胚胎干細(xì)胞;ES-E14TG2a

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗，不做其他科學(xué)實驗外的使用！

商品詳情：

細(xì)胞別稱；ES-E14TG2a；小鼠胚胎干細(xì)胞

種屬來源；小鼠

組織來源；胚胎

生長特性；貼壁生長

細(xì)胞形態(tài)；球形克隆細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；10代以內(nèi)

背景簡介；ES-E14TG2a細(xì)胞缺乏HGPRT（HPRT），并且對0.06 mM的6-硫有抗性。當(dāng)在飼養(yǎng)層（胚胎成纖維細(xì)胞或STO細(xì)胞）上培養(yǎng)時，細(xì)胞保持未分化狀態(tài)。在沒有飼養(yǎng)層的情況下，細(xì)胞自發(fā)分化并形成胚胎結(jié)構(gòu)。當(dāng)注入胚泡中時，細(xì)胞可以進(jìn)入生殖系。在常規(guī)的分子基因修飾技術(shù)之后，它們可用于重構(gòu)小鼠胚胎。

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25或1mL凍存管

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞培養(yǎng)注意事項 ：

一、 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

二、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。

三、用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

四、貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

五、 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

六、 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

七、該細(xì)胞僅供科研使用。

八、備注：運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

九、 注意：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)檢測試劑盒 ，英文名： PⅠCP ELISA Kit

Mouse erythropoietin receptor (EPOR) ELISA Kit 小鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)檢測試劑盒

Mousehydroxyproline,HypELISAKit 小鼠羥脯(Hyp)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit人S100B蛋白

通用型乙酰酯酶活性比色法定量檢測試劑盒50次

ELISAKitPGE1大鼠前列腺素E1

FKBP14重組人 FKBP14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

streptomycin/OVA 鏈偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 5mgstreptomycin/OVA 鏈偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

IL13RA1重組人 IL13RA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGF16 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 FGF16 / FGF-16 蛋白

HAVCR2 Protein Human 重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

streptomycin/OVA 鏈偶聯(lián)血藍(lán)蛋白 5mgstreptomycin/OVA 鏈偶聯(lián)血藍(lán)蛋白

FGF16 Protein Human 重組人 / 食蟹猴 FGF16 / FGF-16 蛋白

FKBP14重組人 FKBP14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

HAVCR2 Protein Human 重組人 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

IL13RA1重組人 IL13RA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠胚胎干細(xì)胞;ES-E14TG2a小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA 試劑盒

Rat brain naiuretic peptide / brain naiuretic peptide (BNP) ELISA Kit 大鼠腦素/腦尿肽(BNP)檢測試劑盒

HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanasialoglycoproteieceptor,AGSPR檢測試劑盒人去唾液酸糖蛋白受體(AGSPR)檢測試劑盒

植物源性食品苦杏仁(apricotkernels)試劑盒20次

Humahymopein,TP-5ELISAKit人五肽(TP-5)檢測試劑盒

無內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T

Endo-freePlasmidMaxiKit   10T

無內(nèi)毒素質(zhì)粒小量提取試劑盒   50T

Endo-freePlasmidMiniKit   100T