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三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用

三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用

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三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用是一種在較高溫度下保存 RNA 樣品的非凍型無(wú)毒溶液,它能 迅速滲入細(xì)胞內(nèi),通過(guò)高效抑制 RNase 的活性而保存 RNA 的完整性。

三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用 詳細(xì)資料

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三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用

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注意事項(xiàng):
三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用● 溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無(wú)水乙醇,即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無(wú)水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無(wú)水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(0 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。

問:常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些?
三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用答:回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過(guò)對(duì)比定量的Marker 來(lái)定量濃度;紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值,OD260/280 比值在.7-.9 之間說(shuō)明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。

問:長(zhǎng)片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用當(dāng)DNA 片段長(zhǎng)度較長(zhǎng)(5   kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
    適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
    2 由于長(zhǎng)片段DNA 不易從樹脂上洗脫下來(lái),建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
    3 減少操作過(guò)程中對(duì)長(zhǎng)片段DNA 的物理?yè)p傷,如混合振蕩操作不要過(guò)于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下。

紫蘇葶;Perillartine CAS 30950-27-7 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格: 20mg

半枝蓮 CAS  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格: g

去甲異波爾定;Laurolitsine CAS 5890-8-6 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格: 20mg

朝藿定B : 0623-73-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

5-甲基-7-甲氧基異黃 CAS 8257-2-2 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格: 20mg

3-O-α-L-鼠李糖-(→2)-β- :  規(guī)格: HPLC≥98%;0mg 訂購(gòu)|咨詢

山柑子堿 : 6873-5-0 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢

木犀草素;Luteolin : 49-70-3 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢

紫蘇醇;Perillyl Alcohol : 536-59-4 規(guī)格: 20mg 訂購(gòu)|咨詢

L-薄荷醇 CAS 226-5-5 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格: 20mg

撲磷(甲噻磷);純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證 CAS  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格: 0.g

三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用3’末端DNA探針同位素([α32P]dATP)轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:20次

E-鈣粘附分子(E-Cadherin/CDH/CD324)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:E-Cadherin/CDH/CD324 ELISA Kit, 英文縮寫:E-Cadherin/CDH/CD324,

非同位素AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:5次

27kDa熱休克蛋白(HSPB)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:HSPB ELISA Kit, 英文縮寫:HSPB,

 細(xì)胞CDK4蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:0/50 次

食物總抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:50次

同種異體移植炎癥因子(AIF)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:AIF ELISA Kit, 英文縮寫:AIF,

GSK-3BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:25次

腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:TNFsR-Ⅰ ELISA Kit, 英文縮寫:TNFsR-Ⅰ,

外切酶體成分7(EXOSC7)elisa檢測(cè)試劑盒 英文名稱:EXOSC7 ELISA Kit, 英文縮寫:EXOSC7,

線蟲β-半乳糖苷酶比色法定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格: 20次

操作步驟:
  三合一 RNA 上樣液 ( 無(wú) EB) .5mL費(fèi)用切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
   ● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
   ● 切膠時(shí),請(qǐng)使用長(zhǎng)波長(zhǎng)UV  (360 nm )光盒。且不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2  稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
   ● 凝膠重量的稱量方法:取.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個(gè)離心管的重量需單獨(dú)稱量。
3  按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對(duì)應(yīng)00 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4  50 ℃水浴7-0min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
   ● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴(yán)重影響DNA 段的回收效率。
   ● 如果總體積大于500 µl,可適當(dāng)增加溶膠時(shí)間。
   ● 若此時(shí)溶液變紅,可加0 µl 3M NaAC  (pH 5.2)。
5  將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
   ● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)榧兓谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA  的能力較弱。
6  2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
   ● 此時(shí)DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7  加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm,  離心min,棄濾液
8  加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm,  離心min,棄濾液。
   ● 溶液PE 初次使用前用無(wú)水乙醇按: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
   ● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 段。
9  加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm,  離心min,棄濾液。
0 2,000 rpm 離心  3min ,以*去除純化柱中的液體。
   ● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA 段的充分溶解。
  將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent  (60℃預(yù)熱),靜置2min 。2,000 rpm  離心min,管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
   ● 溶液Eluent 可用無(wú)菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的段的多少、用戶對(duì)目的濃度要求而定。
   ● 對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會(huì)提高提取DNA 目的段的產(chǎn)量。

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