細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

KMH-2 (人甲狀腺癌細胞(未分化))

商品屬性

商品介紹

年齡（性別） 男性，71歲

組織來源 甲狀腺未分化(間變性)癌

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 紡錘狀細胞、伴有巨細胞

生物安全等級 1

生長培養基 45% DMEM＋45% RPMI-1640＋10% FBS＋1%P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~58小時 (PubMed=11686581)

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。

（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產品：

大鼠肌肉0酸果糖激酶(PFKM)檢測試劑盒 ，英文名： PFKM ELISA Kit

Mouse tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)檢測試劑盒

RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 大鼠多巴胺D1受體(D1R)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFVIII-AgELISAKit大鼠Ⅷ相關抗原

細胞科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR擴增檢測試劑盒20次

RatMethemoglobin,MHBELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)檢測試劑盒規格：96T/48T

SELPLG重組小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MARCKS相關蛋白(MARCKSL1)重組蛋白 Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)

SCN2B重組人 SCN2B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標簽)

食蟹猴

MARCKS相關蛋白(MARCKSL1)重組蛋白 Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)

COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標簽)

SELPLG重組小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 標簽) Protein

食蟹猴

SCN2B重組人 SCN2B 蛋白 (Fc 標簽) Protein

KMH-2 (人甲狀腺癌細胞(未分化))小鼠神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human membrane cofactor protein (MCP/CD46) ELISA Kit 人膜輔蛋白(MCP/CD46)檢測試劑盒

Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit 人低密度脂蛋白受體相關蛋白6(LRP-6)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRH檢測試劑盒山羊促生長激素釋放激素(GHRH)檢測試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)檢測試劑盒規格：96T/48T

小鼠前列腺素F(PGF)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠前列腺素E2(PGE2)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠前列腺素E1(PGE1)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠遷移率族蛋白B1（HMGB-1）檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝