細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

人胚腎細胞+LUC;293T-LUC-puro

商品屬性

商品介紹

細胞別稱；293T-LUC-PURO；人胚腎細胞株-熒光素酶標記；人胚腎細胞-LUC-puro

種屬來源；人

組織來源；腎

生長特性；貼壁生長

細胞形態；上皮細胞樣

背景簡介；Luciferase 293T細胞穩定表達螢火蟲熒光素酶。該細胞株性狀穩定，培養時不需要添加抗生素維持。可用作螢火蟲熒光素酶活性檢測中的陽性對照，也可用于活體動物成像實驗。該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。293T細胞是293 [HEK-293]細胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉衍生株。

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。

（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產品：

大鼠同種異體移植癥因子1(AIF1)檢測試劑盒 ，英文名： AIF1 ELISA Kit

Mouse myeloperoxidase (MPO) ELISA Kit 小鼠髓過氧化物酶(MPO)檢測試劑盒

RatInsulin,INSELISAKit 大鼠胰島素(INS)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHO-2(Mousehemeoxygenase2)ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2

細胞PIM2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitS-100B大鼠S100B蛋白

CD27重組食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK 0.5mgMAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 原活化蛋白激酶3抗原

RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein

DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白

GLA Protein Mouse 重組小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白

MAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK 0.5mgMAPK1/ERK3 (Mitogen-activated protein kinase 3; P44MAPK) 原活化蛋白激酶3抗原

DUSP3 Protein Human 重組人 DUSP3 / VHR 蛋白

CD27重組食蟹猴 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標簽) Protein

GLA Protein Mouse 重組小鼠 alpha-Galactosidase A / GLA 蛋白

RHOA重組人 RhoA 蛋白 Protein

人胚腎細胞+LUC;293T-LUC-puro小鼠抗抗體(AsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human heat shock protein 70 (HSP-70) ELISA Kit 人熱休克蛋白70(HSP-70)檢測試劑盒

Humanmembraneattackcomplex,MACELISAKit 人膜攻擊復合物(MAC)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAngiotensinⅡReceptor2aibody,AT2R-Ab檢測試劑盒人血管緊張素Ⅱ受體2抗體(AT2R-Ab)檢測試劑盒規格：96T/48T

植物甘露糖6-0酸異構酶(mannose-6-phosphateisomerase;MPI)電泳分析試劑盒5次

humanβ-tubulin,TUBBELISAKit人β-微管蛋白(TUBB)檢測試劑盒規格：96T/48T

小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠雌二醇受體(ER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T