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大鼠成骨細胞培養試劑盒【Rat Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】
     大鼠成骨細胞培養試劑盒培養骨代謝過程中，成骨細胞和破骨細胞相互協調，使骨質的形成與吸收處于一種動態平衡，維持骨骼的不斷更新。其中，成骨細胞是骨形成細胞，對骨組織的生長發育、骨代謝平衡、骨量平衡和骨損傷修復起關鍵作用。體外培養成骨細胞，作為常用的體外實驗模型，成為研究骨生理、病理及修復的重要手段，也成為研究成骨細胞生長代謝及骨組織工程的基礎。 雖然骨組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的骨組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的骨組織片能使得骨組織中成骨細胞的一些功能特性發生改變，從而將成骨細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年大鼠的成骨細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成骨原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠成骨細胞培養試劑盒適合于培養大鼠的成骨組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠成骨細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠成骨細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠成骨細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠成骨組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠成骨細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠成骨細胞基礎培養基（5 x00ml） （7）大鼠成骨組織預備液（ x00 ml） （8）大鼠成骨細胞培養試劑盒使用說明書
培養步驟：
大鼠成骨細胞培養試劑盒培養對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

小鼠腸巨噬細胞*培養基00mL

人內臟脂肪細胞*培養基00mL

茄腐鐮刀菌 Fusarium solani

Hepa -6, 小鼠肝細胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桔橙小單孢菌 Micromonospora aurantiaca

大鼠神經元細胞*培養基00mL

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

黑白輪枝孢

大鼠成骨細胞培養試劑盒培養3-(3-溴)吡分子式：234.092英文名稱：3- (3-) pyridine：4422-32-6分子量： CH8BrN

2-羥-3-硝-5-(三氟甲)吡分子式：208.09英文名稱：2- hydroxy -3- nitro -5- (three f) pyridine：33252-64-分子量： C6H3F3N2O3

2-嘧分子式：95.英文名稱：2- amino group：09-2-6分子量： C4H5N3

氨丙咪唑分子式：英文名稱：Ammonium group：分子量：

堿性品綠英文名稱：Basic green分子式：364.9分子量： C23H25ClN2：569-64-2

二甲萘分子式：56.22英文名稱：Two methyl naphthalene：28804-88-8分子量： C2H2

茶海明英文名稱：Dramamine分子式：499.95分子量： C7H2NO.C7H7ClN4O：523-87-5

人參皂甙Rc英文名稱：Ginsenoside Rc分子式：079.2685分子量：C53H90O22：02-4-0

3-(4-溴)-5-甲-H-吡唑分子式：英文名稱：3- (4-) -5- methyl -H-：45353-53-3分子量： C0H9BrN2

三乙氫硼鉀分子式：38.英文名稱：Three ethyl potassium：22560-2-0分子量： C6H6BK

注意事項：
. 接收到大鼠成骨細胞培養試劑盒培養，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。